目录

前言 ..................................................................................................................... 1

第 1 章 仪器系统配置 ................................................................................................ 3

第 2 章 液相色谱在保健品行业的应用 ....................................................................... 4

2.1 保健食品中免疫球蛋白 IgG 的含量分析 .................................. 4

2.2 保健食品中番茄红素的含量分析 ........................................ 5

2.3 保健食品中淫羊藿苷的含量分析 ........................................ 6

第 3 章 保健品中维生素的含量检测 ........................................................................... 7

3.1 保健品中维生素 A 的含量分析 .......................................... 7

3.2 保健品中维生素 C (抗坏血酸) 的含量分析 ............................... 9

3.3 保健品中维生素 E 的含量分析 ......................................... 11

第 4 章 色谱柱推荐及仪器配置 ................................................................................ 14

4.1 保健品中常见分析物质的色谱柱推荐及仪器配置 ......................... 14

4.2 食品中常见分析物质的色谱柱推荐及仪器配置 ........................... 15

前言

保健品行业市场现状

保健品是保健食品的通俗说法，是食品的一个种类，具有一般食品的共性，能调节人体的机能，适用于特定人群食用，但不以治疗疾病为目的。保健品是中国大陆的一般称呼，在国外以及港澳台地区一般称之为：膳食补充剂（Dietary Supplements）。

近年来随着民众健康意识的提升，减肥族、跑步族、养生族越来越多。某电商平台显示，在 2020 年 6・18 期间，眼部保健类产品销售同比 2019 年 6・18 增长 4126%，蛋白粉同比增长 751%、维生素类产品同比增长 387%，其中 95 后、00 后成消费主力，活跃用户同比增长 126%。此外，一些销量靠前的口服类营养产品单价均在 200 元以上，按摩器、泡脚桶等保健仪器平均售价则在 300 元以上。

至 2019 年，中国保健品行业市场规模约达 2227 亿元，2021 年有望突破 3300 亿元。数据显示，中国大健康产业在整体 GDP 中的占比还不到 6%，相比于美国的 16% 和欧洲的 12%，还有很大的增长空间，保健健康产业在中国仍是朝阳产业。

保健品行业国家政策

长期以来，保健品一直是食品药品安全治理的重点领域：

1. 2019 年 5 月 6 日发布的《中华人民共和国食品安全法》指出，依法应当备案的保健食品，备案时应当提交产品配方、生产工艺、标签、说明书以及表明产品安全性和保健功能的材料。食品生产企业可以自行对所生产的食品进行检验，也可以委托符合本法规定的食品检验机构进行检验。
2. 2019 年 4 月，特殊食品安全监督管理司修订《乳品质量安全监督管理条例》；《条例》指出乳品质量安全国家标准应当包括乳品中的致病性微生物、农药残留、兽药残留、重金属以及其他危害人体健康物质的限量规定，通用的乳品检验方法与规程，与乳品安全有关的质量要求，以及其他需要制定为乳品质量安全国家标准的内容。同时禁止在生鲜乳生产、收购、贮存、运输、销售过程中添加任何物质；禁止在乳制品生产过程中添加非食品用化学物质或者其他可能危害人体健康的物质，并要求生产企业具备与所生产乳制品品种和数量相适应的生产、包装和检测设备。
3. 2019 年 8 月 20 日，国家市场监管总局会同国家卫生健康委制定并发布《保健食品原料目录与保健功能目录管理办法》，推进保健食品注册备案双轨制运行。《办法》指出，除维生素、矿物质等营养物质外，纳入保健食品原料目录的原料应当符合新要求，提出拟纳入或者调整保健食品原料目录的建议应包括工艺要求、质量标准、功效成分或者标志性成分及其含量范围和相应检测方法、适宜人群和不适宜人群相关说明、注意事项等。该《办法》已于 2019 年 10 月 1 日起正式实施。
4. 2019 年 12 月 1 日《中华人民共和国食品安全法实施条例》等政策落地，被称为 “史上严”《食品安全法》的配套法规开始实施。该《条例》指出，保健食品、特殊医学用途配方食品、婴幼儿配方食品等特殊食品不属于地方特色食品，不得对其制定食品安全地方标准；保健食品生产工艺有原料提取、纯化等前处理工序的，生产企业应当具备相应的原料前处理能力。
6. 截至 2021 年 2 月份，我国保健食品注册和备案分别为 16300 余件和 6500 余件，其中保健食品注册备案双轨制实施以来，新注册保健食品 2000 余件，国内保健食品生产企业 1600 余家；实有婴配乳粉产品配方注册 1315 个，国内婴配乳粉生产企业 115 家；特医食品配方注册 58 个，国内特医食品生产企业 15 家。
8. 2021 年 3 月 15 日，安徽省市场监管局制定《2021 年全省特殊食品安全监管工作要点》，《要点》指出要推进保健食品行业专项清理整治行动，继续实施重点检查、飞行检查、“双随机一公开” 监督抽查和跨部门 “双随机” 联合检查；持续强化特殊食品生产质量控制，开展保健食品生产企业生产过程专项检查。

第 1 章 仪器系统配置

EClassical 3200 高效液相色谱系统，是99热在线观看设计开发的具有自主知识产权的新型高效亚洲熟妇无码乱子AV电影，集聚了99热在线观看多年来技术的传承、经典的延续，且含有多个创新专利技术，在满足不断升级的法规要求的同时，重新定义国产液相的外观设计，完善分析过程中的自动性、连续性、完整性，展现实际选择时的灵活性、实验室结果的稳定性，满足实验室低成本、高效率运行的可行性。

2.1 保健食品中免疫球蛋白 IgG 的含量分析

参照国标《GB/T 5009.194-2003 保健食品中免疫球蛋白 IgG 的测定》。

2.1.1 样品预处理

1. 对照品：IgG 标准储备液：称取 IgG 标准品 0.010g，用流动相 A 溶解并定容至 10.0mL，摇匀，浓度为 1.0mg/mL。
2. 供试品：称取供试品 0.1g（精确至 0.001g）试样，用流动相 A 稀释至 25.0mL，摇匀；取以上样品 10mL 用流动相 A 稀释至 30mL，通过 0.45μm 微孔滤膜后进样。

2.1.2 色谱条件

• 色谱柱：Pharmacia hi-trap Protein G 柱，1mL
• 流动相：流动相 A：0.05mol/L 磷酸盐缓冲液，调 pH=6.5流动相 B：0.05mol/L 甘氨酸盐酸缓冲液，调 pH=2.5
• 流速：0.4mL/min
• 检测波长：280nm
• 进样体积：20μL
• 柱温：室温

2.1.3 谱图结果

2.2 保健食品中番茄红素的含量分析

参考国标《GB/T 22249-2008 保健食品中番茄红素的测定》。

2.2.1 样品预处理

焦性没食子酸 - 二氯甲烷溶液：称 5g 焦性没食子酸用二氯甲烷溶解并定容至 100mL。

根据试样中番茄红素的含量，称取 0.5g~2.0g 均匀试样置于 25mL 棕色容量瓶中，加焦性没食子酸 - 二氯甲烷溶液 20mL，超声提取 30min 后，加焦性没食子酸 - 二氯甲烷溶液定容至刻度，摇匀过 0.45μm 滤膜，滤液备用。

2.2.2 色谱条件

色谱柱：Supersil ODS2 5μm 4.6×150mm

流动相：乙腈 / 甲醇 = 50/50（V/V）

流速：1.0mL/min

检测波长：472nm

进样体积：10μL

柱温：30℃

2.2.3 谱图结果

2.3 保健食品中淫羊藿苷的含量分析

参考国标《GB/T 22247-2008 保健食品中淫羊藿苷的测定》。

2.3.1 色谱条件

• 色谱柱：Agressif C18 5μm 4.6×250mm
• 流动相：甲醇 / 水 / 醋酸 = 55/44/1（V/V/V）
• 流速：1.0mL/min
• 检测波长：270nm
• 进样体积：5μL
• 柱温：室温

2.3.2 谱图结果

第 3 章 保健品中维生素的含量检测

3.1 保健品中维生素 A 的含量分析

参考国标《GB 5009.84-2016 食品中维生素 A、D、E 的测定》。

3.1.1 标准溶液配制

维生素 A 标准储备溶液（0.500mg/mL）：准确称取 25.0mg 维生素 A 标准品，用无水乙醇溶解后，转移入 50mL 容量瓶中，定容至刻度，此溶液浓度约为 0.500mg/mL。将溶液转移至棕色试剂瓶中，密封后在 - 20℃下避光保存，有效期 1 个月。

3.1.2 样品前处理

皂化

• 不含淀粉样品：称取 2g~5g（精确至 0.01g）经均质处理的固体试样或 50g（精确至 0.01g）液体试样于 150mL 平底烧瓶中；固体试样需加入约 20mL 温水，混匀；再加入 1.0g 抗坏血酸和 0.1g BHT，混匀；加入 30mL 无水乙醇、10mL~20mL 氢氧化钾溶液，边加边振摇，混匀后于 80℃恒温水浴震荡皂化 30min，皂化后立即用冷水冷却至室温。
• 含淀粉样品：称取 2g~5g（精确至 0.01g）经均质处理的固体试样或 50g（精确至 0.01g）液体样品于 150mL 平底烧瓶中；固体试样需用约 20mL 温水混匀，加入 0.5g~1g 淀粉酶，放入 60℃水浴避光恒温振荡 30min 后取出；向酶解液中加入 1.0g 抗坏血酸和 0.1g BHT，混匀；加入 30mL 无水乙醇、10mL~20mL 氢氧化钾溶液，边加边振摇，混匀后于 80℃恒温水浴振荡皂化 30min，皂化后立即用冷水冷却至室温。

提取

将皂化液用 30mL 水转入 250mL 分液漏斗中，加入 50mL 石油醚 - 乙醚混合液，振荡萃取 5min；将下层溶液转移至另一 250mL 分液漏斗中，加入 50mL 混合醚液再次萃取，合并醚层。

注：如只测维生素 A 与 α- 生育酚，可用石油醚作提取剂。

洗涤

用约 100mL 水洗涤醚层，重复 3 次，直至醚层洗至中性（可用 pH 试纸检测下层溶液 pH 值），去除下层水相。

浓缩

将洗涤后的醚层经无水硫酸钠（约 3g）滤入 250mL 旋转蒸发瓶或氮气浓缩管中；用约 15mL 石油醚冲洗分液漏斗及无水硫酸钠 2 次，并入蒸发瓶内；将蒸发瓶接在旋转蒸发仪或气体浓缩仪上，于 40℃水浴中减压蒸馏或气流浓缩，待瓶中醚液剩约 2mL 时，取下蒸发瓶，立即用氮气吹至近干；用甲醇分次将蒸发瓶中残留物溶解并转移至 10mL 容量瓶中，定容至刻度；溶液过 0.22μm 有机系滤膜后供高效液相色谱测定。

3.1.3 色谱条件

• 色谱柱：Supersil ODS2 5μm，4.6mm×250mm
• 流动相：A 相（水）、B 相（甲醇），梯度洗脱
• 流速：0.8mL/min
• 检测波长：325nm
• 进样体积：10μL
• 柱温：35℃

3.2 保健品中维生素 C (抗坏血酸) 的含量分析

参考国标《GB5009.86-2016 食品中抗坏血酸的测定》。

3.2.1 标准溶液配置

1. L (+)- 抗坏血酸标准贮备溶液 (1.000mg/mL)：准确称取 L (+)- 抗坏血酸标准品 0.01g（精确至 0.01mg），用 20g/L 的偏磷酸溶液定容至 10mL。
2. D (-)- 抗坏血酸标准贮备溶液 (1.000mg/mL)：准确称取 D (-)- 抗坏血酸标准品 0.01g（精确至 0.01mg），用 20g/L 的偏磷酸溶液定容至 10mL。
3. 抗坏血酸混合标准系列工作液：分别吸取 L (+)- 抗坏血酸和 D (-)- 抗坏血酸标准贮备液 0mL、0.05mL、0.50mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL，用 20g/L 的偏磷酸溶液定容至 100mL。
4. 标准系列工作液中 L (+)- 抗坏血酸和 D (-)- 抗坏血酸的浓度分别为 0μg/mL、0.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL，临用时配制。

3.2.2 试样溶液的制备

称取相对于样品约 0.5g~2g（精确至 0.001g）混合均匀的固体试样或匀浆试样，或吸取 2mL~10mL 液体试样（使所取试样含 L (+)- 抗坏血酸约 0.03mg~6mg）于 50mL 烧杯中；用 20g/L 的偏磷酸溶液将试样转移至 50mL 容量瓶中，震摇溶解并定容；摇匀后全部转移至 50mL 离心管中，超声提取 5min，于 4000r/min 离心 5min；取上清液过 0.45μm 水相滤膜，滤液待测（由此试液可同时分别测定试样中 L (+)- 抗坏血酸和 D (-)- 抗坏血酸的含量）。

3.2.3 试样溶液的还原

准确吸取 20mL 上述离心后的上清液于 50mL 离心管中，加入 10mL 40g/L 的 L - 半胱氨酸溶液；用 100g/L 磷酸三钠溶液调节 pH 至 7.0~7.2，以 200 次 /min 振荡 5min；再用磷酸调节 pH 至 2.5~2.8，用水将试液全部转移至 50mL 容量瓶中并定容至刻度；混匀后取此试液过 0.45μm 水相滤膜后待测（由此试液可测定试样中包括脱氢型的 L (+)- 抗坏血酸总量）。

若试样含有增稠剂，可准确吸取 4mL 经 L - 半胱氨酸溶液还原的试液，再准确加入 1mL 甲醇，混匀后过 0.45μm 滤膜后待测。

3.2.4 色谱条件

• 色谱柱：Supersil ODS2 5μm 4.6mm×250mm
• 流动相：A 相：0.05mol/L 磷酸二氢钾和 0.0025mol/L 十六烷基三甲基溴化铵溶液（甲醇 / 水 / 醋酸 = 55/44/1）B 相：甲醇A/B=2/98（V/V）
• 流速：0.7mL/min
• 检测波长：245nm
• 进样体积：20μL
• 柱温：室温

3.2.5 谱图结果

3.3 保健品中维生素 E 的含量分析

参考国标《GB 5009.84-2016 食品中维生素 A、D、E 的测定》。

3.3.1 标准溶液配制

维生素 E 标准储备溶液（1.000mg/mL）：分别准确称取 α- 生育酚、β- 生育酚、γ- 生育酚和 δ- 生育酚各 50.0mg，用无水乙醇溶解后，转移入 50mL 容量瓶中，定容至刻度，此溶液浓度约为 1.00mg/mL。将溶液转移至棕色试剂瓶中，密封后在 - 20℃下避光保存，有效期 6 个月。

3.3.2 样品前处理

皂化

• 不含淀粉样品：称取 2g~5g（精确至 0.01g）经均质处理的固体试样或 50g（精确至 0.01g）液体试样于 150mL 平底烧瓶中；固体试样需加入约 20mL 温水，混匀；再加入 1.0g 抗坏血酸和 0.1g BHT，混匀；加入 30mL 无水乙醇、10mL~20mL 氢氧化钾溶液，边加边振摇，混匀后于 80℃恒温水浴震荡皂化 30min，皂化后立即用冷水冷却至室温。
• 含淀粉样品：称取 2g~5g（精确至 0.01g）经均质处理的固体试样或 50g（精确至 0.01g）液体样品于 150mL 平底烧瓶中；固体试样需用约 20mL 温水混匀，加入 0.5g~1g 淀粉酶，放入 60℃水浴避光恒温振荡 30min 后取出；向酶解液中加入 1.0g 抗坏血酸和 0.1g BHT，混匀；加入 30mL 无水乙醇、10mL~20mL 氢氧化钾溶液，边加边振摇，混匀后于 80℃恒温水浴振荡皂化 30min，皂化后立即用冷水冷却至室温。

提取

将皂化液用 30mL 水转入 250mL 分液漏斗中，加入 50mL 石油醚 - 乙醚混合液，振荡萃取 5min；将下层溶液转移至另一 250mL 分液漏斗中，加入 50mL 混合醚液再次萃取，合并醚层。

注：如只测维生素 A 与 α- 生育酚，可用石油醚作提取剂。

洗涤

用约 100mL 水洗涤醚层，重复 3 次，直至醚层洗至中性（可用 pH 试纸检测下层溶液 pH 值），去除下层水相。

浓缩

将洗涤后的醚层经无水硫酸钠（约 3g）滤入 250mL 旋转蒸发瓶或氮气浓缩管中；用约 15mL 石油醚冲洗分液漏斗及无水硫酸钠 2 次，并入蒸发瓶内；将蒸发瓶接在旋转蒸发仪或气体浓缩仪上，于 40℃水浴中减压蒸馏或气流浓缩，待瓶中醚液剩约 2mL 时，取下蒸发瓶，立即用氮气吹至近干；用甲醇分次将蒸发瓶中残留物溶解并转移至 10mL 容量瓶中，定容至刻度；溶液过 0.22μm 有机系滤膜后供高效液相色谱测定。

3.3.3 色谱条件

• 色谱柱：Ecosil C30 120Å 3μm 4.6×250mm 或 SinoChrom Si60 5μm 4.6×150mm
• 流动相：A 相（水）、B 相（甲醇），梯度洗脱
• 流速：0.8mL/min
• 检测波长：294nm
• 进样体积：10μL
• 柱温：室温

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上述内容为《液相色谱在保健品行业的应用及维生素检测解决方案》全文原样呈现，完整 PDF 文档额外包含以下核心资源，点击链接即可获取：

1. 高清资料：所有章节谱图（免疫球蛋白 IgG、番茄红素、淫羊藿苷、维生素 A/C/E 等）高清版（含峰形放大细节、基线噪声标注）、实际保健品样品（牛初乳粉、维生素补充剂）检测原始谱图；
2. 操作指南：样品皂化 / 萃取操作视频、色谱柱活化与维护教程、梯度洗脱程序设置演示；
3. 拓展数据：各检测项目（免疫球蛋白、番茄红素、维生素）的线性方程（R²≥0.999）、检出限 / 定量限报告、加标回收率数据（85%-105%）、精密度验证结果（RSD＜3%）；
4. 附录文件：GB/T 5009.194-2003、GB 5009.84-2016 等标准原文节选、仪器操作安全规范、耗材订货清单（色谱柱、试剂、滤膜型号编码）。

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