在实验室里做高效液相色谱（HPLC）分析，基线稳定是实验能顺利进行的基础，数据准不准全看它。 基线要么布满毛刺，噪声大得让人头疼；要么就慢慢往上飘，或者一个劲儿往下掉。这些问题不仅让数据重复性差，折腾半天结果也没法用，依利科技提供实用的技术支持，帮着解决这些麻烦，为您整理常见基线问题处理方式。

​一、基线不稳定的表现​

基线噪声大是容易发现的，好好的一条线，突然布满小毛刺，这样一来峰积分就没法准确计算，仪器灵敏度也跟着下降，那些含量低的组分，很可能就检测不出来了。​

基线漂移也很常见，就是基线慢慢上爬或下滑。它带来麻烦的是，有时会将目标峰部分甚至全部掩盖住，造成色谱峰面积积分损失，严重影响定量准确性，甚至无法进行定量分析。​

还有比如泵运转时的脉动带来的基线周期性波动，对低浓度组分峰的检测影响非常大，容易引起误判，甚至直接将这样的小色谱峰忽略掉。​

二、常见原因及解决方案​

1. 流动相问题​

流动相就像仪器的 “血液”，它出问题，基线马上就有反应。流动相脱好不彻底，气泡进入检测器的检测池，就会引基线上下跳动，因为气泡在检测池里会干扰光的透过和折射。配制流动相的溶剂的纯度也要符合要求。如果溶剂纯度低，里面的杂质随流动相进入检测系统，干扰信号，让基线变得杂乱。另外，配制好的缓冲盐溶液放久了，可能会析出沉淀，pH 值发生变化，这些都会导致基线不稳。​

解决流动相的问题其实不难。首先脱气要做好，实验室常用超声处理，条件允许的话用在线脱气机更靠谱，能持续去除气泡。其次，一定要用 HPLC 级溶剂，杂质少，能减少干扰。倒溶剂时要小心，试剂瓶及时盖好，避免污染。缓冲盐流动相好现配现用，配好后尽快使用，别放太久，防止析出沉淀或 pH 变化。​

2. 检测器问题​

检测器是接收信号的关键，它状态不好，基线肯定受影响。氘灯、钨灯用久了会老化，能量不足，发出的光不稳定，检测器接收的信号就会波动，基线自然不稳。流通池也容易出问题，里面脏了或者有气泡没排净，会影响光的传播，导致信号异常，基线要么有噪声，要么就漂移。​

处理检测器问题，先检查灯的能量。一般氘灯使用寿命在 1000-2000 小时，快到时间或者感觉能量明显下降，就及时更换。流通池脏了，用甲醇或稀硝酸超声清洗，把脏东西和气泡清理掉，让它保持洁净。​

3. 泵或系统问题​

泵是推动流动相的动力，它出问题，整个系统都稳不了。泵的密封圈磨损了，可能会漏液，或者导致压力波动，流动相流速不稳定，基线就会跟着晃。单向阀堵塞也很麻烦，会让流速忽快忽慢，系统无法平稳运行，基线肯定不稳定。​

解决泵和系统的问题，定期维护是关键。发现泵密封圈磨损，赶紧更换，这是泵正常工作的基础。单向阀堵塞了，用异丙醇浸泡 10 分钟左右，再超声清洗，通常能清除堵塞物，让单向阀恢复正常。​

4. 色谱柱问题​

色谱柱是分离组分的核心，它状态不佳也会导致基线问题。用久了，色谱柱里会积累污染物，柱效下降，分析时可能出现异常峰或基线波动。另外，柱温波动也有影响，温度变化会改变组分在固定相和流动相中的分配，影响保留时间，进而导致基线漂移。​

保养色谱柱，要定期冲洗或再生，具体方法参考色谱柱说明书，按步骤去除污染物。同时，用柱温箱稳定柱温，减少温度波动，这样基线能稳定不少。​

5. 环境干扰​

外界环境的干扰也不能忽视。实验室电压不稳，检测器供电受影响，信号会波动，基线噪声增大。周围的电磁干扰也头疼，像离心机、空调这些设备运行时产生的电磁信号，可能干扰检测器，让基线不稳。​

应对环境干扰，首先给仪器接稳压电源，保证供电稳定。其次，放置仪器时远离电磁干扰源，同时做好仪器接地，减少电磁干扰的影响。​

三、日常维护建议（预防措施）​

做好日常维护，能大大减少基线不稳的问题。​

流动相管理上，坚持用 HPLC 级溶剂，避免因纯度问题引入干扰。每次使用前，脱气处理要到位，不管是超声还是在线脱气，都要保证效果。​

检测器维护很关键，记录好氘灯使用时间，快到使用寿命时提前准备更换，别等能量不足影响实验。流通池也要定期清洗，保持洁净，确保检测信号准确。​

系统稳定性检查不能少，定期校准泵的流速，保证流动相输送稳定。经常检查管路是否漏液，发现问题及时处理，避免影响系统压力和流速。​

色谱柱保养也重要，使用保护柱能减少污染物进入分析柱，延长其使用寿命。色谱柱长期不用时，用纯有机相妥善保存，防止填料变质。​